Lasting av kontrollantistoffer er viktige kontroller ettersom de indikerer lik belastning av prøver i alle brønner. Lastekontroller indikerer også riktig overføring av proteiner til membranen under western blotting-prosessen. Lastekontroller er vanligvis proteiner med høyt og allestedsnærværende uttrykk.
Hva gjør en lastekontroll?
En ladekontroll er et protein som brukes som kontroll i et Western blotting-eksperiment. … De er brukt for å sikre at proteinet har blitt lastet likt i alle brønner.
Hvorfor bruker vi en lastekontroll i Western blot?
Lastekontroller har en annen rolle som kontroll i western blots. De kan brukes for å kontrollere at det har vært jevn overføring fra gelen til membranen over hele gelen. Dette er avgjørende når det gjøres sammenligninger av proteinekspresjonsnivåene mellom prøver.
Hvordan bruker du lastekontrollen i Western blot?
Signalene fra lastekontroller brukes vanligvis for å normalisere signalene fra proteinene av interesse. For å bruke en belastningskontroll for disse formålene bør deteksjon med kontrollproteinantistoff og det eksperimentelle antistoffet gjøres på samme blot. En rekke forskjellige proteiner brukes som innlastingskontroller.
Hvorfor brukes aktin som en lastekontroll?
Beta-aktin, brukes vanligvis som en lastekontroll for Western Blot tilnormaliser nivåene av protein påvist ved å bekrefte at proteinbelastningen er den samme over gelen.
