Densitometridata generert for Western blots er vanlige brukt for å sammenligne proteinoverflod mellom prøver. … Ikke-lineære densitometridata ble observert når Western blots ble påvist ved bruk av infrarød fluorescens eller kjemiluminescens, og under forskjellige SDS-PAGE-betingelser.
Hva er densitometrianalyse?
Densitometry er den kvantitative målingen av optisk tetthet i lysfølsomme materialer, som fotografisk papir eller fotografisk film, på grunn av eksponering for lys.
Hvordan bruker du densitometri i bilde J?
Densitometri med ImageJ
- Klikk midten av firkanten og dra den over til neste kjørefelt. …
- For siste bane, gjenta prosedyren, men trykk Ctrl og 3 for å angi siste bane. …
- Bruk linjeverktøyet til å tegne linjene for å eliminere kjørefeltbakgrunnen fra beregningene. …
- Gå til: Analyse→Gels→Label Peaks for å få rapporten.
Hvordan analyserer du Western blot-resultater?
Valider kvantifiseringsverktøyene dine . Kjør for eksempel en blot der banene er lastet med 20 µg, 15 µg og 10 µg tot alt protein. Etter analyse bør den relative kvantifiseringen av målbåndene være 2, 1,5 og 1. Prøv forskjellige kvantifiseringsverktøy og innstillinger til du pålitelig kan reprodusere de riktige resultatene.
Hvordan kvantifiserer du en western blot?
Trinn 1: Bestem bakgrunnen som trekkes fratettheter av proteinet av interesse (PI) og normaliseringskontrollen (NC). Trinn 2: Identifiser NC som har høyest tetthetsverdi. Trinn 3: Del alle NC-verdiene med den høyeste NC-tetthetsverdien for å få en relativ NC-verdi.
