Produktet av restriksjonsfordøyelse kan enkelt lagres ved -20 C. Ved 4 C ville det være greit, men for å sikre at det ikke er noen aktivitet og ingen stjerneaktivitet er det anbefales å holde den ved -20 C.
Hvordan lagrer du fordøyd DNA?
Prøv oppbevar gelskiven i kjøleskapet over natten, eller til og med smelt skiven i buffer og fryse den ved -20°C eller -80°C. Nedbrytning av DNA vil skje med samme hastighet og under samme forhold som løselig DNA, så bruk en kaldere temperatur for lengre lagring.
Hva betyr det at et plasmid skal fordøyes?
Renset plasmid-DNA fordøyes med 1 eller flere restriksjonsenzymer (REs) valgt for å gi et distinkt DNA-båndmønster som lett løses ved elektroforese. … Restriksjonsenzymer som skjærer i det multiple kloningsstedet (MCS) og resulterer i et diagnostisk mønster på 2-5 bånd som er enkle å løse, velges vanligvis.
Hvordan lagrer du lineariserte plasmider?
Hvis du er bekymret for nedstrømseffekter av TE, lagre DNA ved en høyere konsentrasjon og fortynn ved behov, eller bruk "lav TE" som er 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. når DNA eller RNA er rent kan det lagres ved -20C i mange måneder uten nedbrytning.
Hvor lenge kan du beholde restriksjonssammendrag?
Pro-Tip Avhengig av applikasjonen og mengden DNA i reaksjonen, kan inkubasjonstiden variere fra 45 minutter til over natten. For diagnostiske sammendrag er 1-2 timer ofte tilstrekkelig. For fordøyelser med >1 µg DNA brukt til kloning, anbefales det at du fordøyer i minst 4 timer.