Inkuber karet i romtemperert i 2-3 minutter . Godt klebende celler kan løsnes raskt ved 37 °C. Observer cellene under mikroskop. De løsrevne cellene virker avrundede og brytbare under mikroskop.
Hva skjer hvis du trypsiniserer cellene for lenge?
Inkubering av celler med for høy trypsinkonsentrasjon i for lang tidsperiode vil skade cellemembraner og drepe cellene. Hvis du er usikker på konsentrasjonen av trypsin du skal bruke, bruk en lav konsentrasjon.
Hvordan trypsiniserer du celler?
Cellene kan resuspenderes ved å pipettere cellesuspensjonen forsiktig for å bryte opp klumpene. Ytterligere fortynning kan gjøres, om nødvendig, for celletall og/eller subkultur.
Hvor lang tid tar det før celler festes?
de første cellene festes allerede etter 3-5 min! Etter min erfaring ble de fleste EC-ene festet etter 10-20 minutter. Men jo lenger du venter, jo mer fast er vedlegget.
Er det ille å trypsinisere celler to dager på rad?
Ja, det er skadelig hvis du trypsiniserer cellene kontinuerlig etter 24 timers deling. Det anbefales å gjøre deling etter 48 timers deling. … Du kan opprettholde celler til morfologien er god (det avhenger av celletypen din, noen celler kan gå opp til 80 passasjer og noen opp til 10).
