I de siste årene har Coriell brukt alt varmeinaktivert serum til cellekulturene sine for å inaktivere komplementproteinet som finnes i serum fra nyfødt kalve. Siden vi har endret til føt alt bovint serum, finner vi ut at varmeinaktivering er ikke nødvendig for de fleste cellelinjer.
Hvor lenge varmer du inaktivere FBS?
Følgende protokoll er foreslått for varmeinaktivering av føt alt bovint serum (FBS). FBS varmes opp til 56± 2°C i 30± 2 minutter i rørende vannbad. Heat Inactivation (HI) – en prosess der FBS holdes ved en temperatur på 56± 2° i 30± 2 minutter.
Hvorfor er varmeinaktivering nødvendig for FBS før bruk?
En vanlig behandling av FBS er varmeinaktivering, hvor FBS varmes opp til 56°C i 30 minutter i vannbad med sporadisk risting. Hensikten er å inaktivere komponentene i komplementsystemet som finnes i FBS [24], og andre potensielle ukjente hemmere av cellevekst.
Hvorfor må du varme inaktiver serum?
Målet med varmeinaktivering er å ødelegge komplementaktiviteten i serumet uten å påvirke de vekstfremmende egenskapene til produktet. Fjerning av komplementaktivitet fra serumet er ikke nødvendig for de fleste cellekulturer, men kan være nødvendig for kulturer som er følsomme for komplementaktiviteten.
Hvordan lagrer du varmeinaktivert FBS?
Beskytt tint FBS og andre sera med sikker kjøling ogOppbevaring. Bruk tint serum umiddelbart. Flytende FBS og annet serum kan oppbevares i kjøleskap (2 til 8 °C) opp til fire uker.