Jo større molekylvekt, jo lengre spolen og jo saktere går molekylet. Så elektroforese + SDS separeres på grunnlag av molekylvekt, ikke på grunnlag av naturlig ladning. Viktig merknad: Proteiner av samme lengde kan vanligvis ikke separeres ved gelelektroforese + SDS.
Hvordan skiller du proteiner med samme molekylvekt?
Sentrifugering, elektroforese og kromatografi er de vanligste teknikkene for å rense og analysere proteiner. Sentrifugering separerer proteiner basert på sedimenteringshastigheten, som påvirkes av massen og formen deres.
Hvilke teknikker skiller proteiner på grunnlag av kostnad?
Proteiner kan separeres på grunnlag av deres nettoladning ved ionebyttekromatografi. Hvis et protein har en netto positiv ladning ved pH 7, vil det vanligvis binde seg til en kolonne med perler som inneholder karboksylatgrupper, mens et negativt ladet protein ikke vil (Figur 4.4).
Hvilken av de følgende teknikkene er best egnet for å separere proteiner basert på molekylvekt?
Kromatografimetoder basert på partisjon er svært effektive for separasjon og identifikasjon av små molekyler som aminosyrer, karbohydrater og fettsyrer. Imidlertid er affinitetskromatografier (dvs. ionebyttekromatografi) mer effektive i separasjonen av makromolekyler som nukleinsyrer og proteiner.
Hvilken type kolonnekromatografi skiller proteiner på grunnlag av molekylvekt?
Gelfiltrering (GF) kromatografi skiller proteiner utelukkende på grunnlag av molekylstørrelse. Separasjon oppnås ved å bruke en porøs matrise som molekylene av steriske årsaker har ulik tilgang til - dvs. mindre molekyler har større tilgang og større molekyler er ekskludert fra matrisen.
