Men når emisjonsspektra overlapper, kan fluorescens fra mer enn ett fluorokrom bli oppdaget. For å korrigere for denne spektrale overlappingen, brukes en prosess med fluorescenskompensasjon. Dette sikrer at fluorescensen detektert i en bestemt detektor stammer fra fluorokromen som blir målt.
Hvorfor trenger vi kompensasjon i flowcytometri?
Kompensasjon kreves for et flowcytometrieksperiment på grunn av fluorescensfysikken. En fluorokrom er opphisset, og sender ut et foton i en rekke bølgelengder. Noen av disse fotonene søler inn i en andre detektor, noe som får enkeltfargede prøver til å virke dobbelt positive.
Hva er hovedformålet med å bruke en kompensasjonscelle?
Det primære formålet er å tillate måling av den sanne fluorescensen i den primære kanalen forurenset av spillover fra nærliggende fluoroforer. Derfor korrigerer kompensasjon for fluorescens-"overtredelse" mellom fluoroforer. Den er imidlertid ikke perfekt og kan ikke fikse alle de uønskede effektene.
Hva er kompensasjonsmatrise?
En kompensasjonsmatrise beregnes ved å bruke enkeltfargede fluorescerende kontrollfiler som samles inn på ImageStream eller FlowSight med alle kanaler samlet og i fravær av lysfeltbelysning eller SSC.
Hva er spektralkompensasjon?
Bruker spektralKompensasjon betyr at signal fra ikke-primære detektorer fortsatt brukes til å forbedre det sanne signalet til markører der det er mulig. De primære kontrollprøvene brukes til parameternavning. … Prøver brukt for primærdetektorer hjelper også med å navngi disse parameterne etter spektralkompensasjon.
